Nuevo test de medicina personalizada en hemopatA�as malignas

Los test ex vivo de muerte celular inducible por fA?rmacos para hemopatA�as malignas han sido ampliamente desarrollados y validados durante los A?ltimos 10 aA�os. Bosanquet y cols. han revisado recientemente 1929 correlaciones clA�nicas publicadas de estos test ex vivo de pacientes con hemopatA�as malignas (Bosanquet et al. 2008). A pesar de tener limitaciones (alguna de las cuales supera nuestro nuevo test), los test ex vivo ya han sido comercializados desde hace unos aA�os en EEUU y Europa. El primer ensayo clA�nico en leucemia que ha validado este tipo de test ex vivo, referente al ensayo aquA� propuesto, ha sido realizado recientemente en Gran BretaA�a por el Dr. Andrew Bosanquet (Bosanquet et al. 2006; Catovsky et al. 2007). Pero antes de abordar la descripciA?n de nuestro nuevo test de medicina personalizada, definimos a continuaciA?n los puntos mA?s relevantes del estado actual de los test ex vivo.

En la actualidad existen varios test funcionales de quimioresistencia en muestras ex vivo. La estrategia inicial, de finales de los aA�os 70 y principio de los 80, era evaluar el crecimiento clonogA�nico de los tumores. Este crecimiento caracterA�stico en las neoplasias sirviA? para identificar fA?rmacos que lo bloqueasen o atenuasen, pero tardaban semanas en proporcionar resultados lo que, junto con otras dificultades tA�cnicas, limitA? su uso en la clA�nica (Hamburger et al. 1977; Marie et al. 1983). Estos mA�todos clonogA�nicos fueron sustituidos en la dA�cada de los 80 por test funcionales de muerte celular, que sA� que muestran una buena correlaciA?n con el pronA?stico. La mayorA�a son test de muerte celular que evalA?an la poblaciA?n celular total sin distinguir las cA�lulas malignas y su duraciA?n estA? comprendida entre 4-7 dA�as. Estos test difieren entre sA� en cuanto a los mA�todos utilizados para determinar la supervivencia celular al final del test. Estas tA�cnicas permiten medir directamente las cA�lulas tumorales, como en el presente estudio, o indirectamente, utilizando marcadores de muerte celular tumoral no selectiva, un enfoque adoptado en la mayorA�a de los mA�todos hasta el momento.

A los test de medicina personalizada ex vivo se les dio recientemente el tA�rmino genA�rico de ITRT (del inglA�s: Individual Tumor Response Test/Testing-, Test de Respuesta Tumoral Individual). Se basan en la medida del a�?a�?efecto de los tratamientos anticancer en cA�lulas tumorales vivas obtenidas a partir de muestras frescas de cada pacientea�? y no se incluyen test con a�?fraccciones subcelulares y cA�lulas animales o humanasa��a��. El Dr. Bosanquet ha desarrollado un test ya validado, el denominado DISC Assay (del inglA�s Diferential Staining Cytotoxicity)- y su versiA?n mA?s reciente llamada TRAC Assay (Tumor Response to Antineoplastic Compounds). En estos tests se utilizan sistemas de microscopA�a para evaluar el porcentaje de cA�lulas aA?n vivas despuA�s de haber sido expuestas a fA?rmacos (Figura 1) (Weisenthal et al. 1983; Bosanquet et al. 1996; Bosanquet et al. 2009). En otro ITRT,el test MTT, las cA�lulas supervivientes reducen el metil-tiazol-tetrazolium (MTT) a formazan, una reacciA?n colorimA�trica que puede ser cuantificada en un espectrA?metro (Carmichael et al. 1987; Sargent et al. 1989; Pieters et al. 1990). Otros test usan diacetato de fluoresceA�na (FMCA) o los niveles de ATP celular como marcadores indirectos de viabilidad celular (Larsson et al. 1992; Rhedin et al. 1993).

Los resultados de la respuesta tumoral individualizada ex vivo correlacionan muy bien con la posterior respuesta al tratamiento y supervivencia de los pacientes. El test TRAC ha sido desarrollado y validado en ensayos clA�nicos en LLC por el Dr. Bosanquet, y su precursor, el test DiSC ha sido comercializado por varias compaA�A�as entre las que se incluye Oncotech en EEUU (una filial de Exiqon Diagnostics en Dinamarca). Los resultados de estos test muestran una sensibilidad del 94% y una precisiA?n en la predicciA?n negativa del 92%. AdemA?s, han demostrado que los tratamientos basados en los resultados del mismo podrA�an aumentar los aA�os de supervivencia (Figura 1) (Bosanquet et al. 1996; Bosanquet et al. 1999; Bosanquet et al. 2004).

[|Figura1. ValidaciA?n del test ex-vivo del Dr. Bosanquet en predecir eficacia del tratamiento para LLC validada en pacientes y ensayos clA�nicos. Panel superior: EstadA�stica sobre 510 pacientes demuestra que identifica acertadamente el 92% de los pacientes resistentes al tratamiento y el 94% de los sensibles que responden bien al tratamiento. Panel inferior: Pacientes identificados resistentes a Fludarabina (lA�nea B) tienen menor supervivencia que pacientes identificados sensibles (lA�nea A). (Bosanquet et al. 1999)|]

En la actualidad, la capacidad predictiva de los test ex vivo de muerte celular (apoptosis) para evaluar la actividad citotA?xica y citostA?tica de fA?rmacos viene avalada por mA?ltiples publicaciones cientA�ficas. En una revisiA?n realizada por Bosanquet et al. (2008), se analizaron por separado los resultados obtenidos en cada hemopatA�a maligna. Como fue un cotejo de estudios observacionales (mA?s que de ensayos clA�nicos), se podrA�a esperar que el porcentaje de pacientes que hubiesen respondido hubiese sido mayor si se hubiese utilizado el resultado del test ex vivo para orientar al tratamiento. Esto serA�a especialmente evidente en pacientes cuyos test fueron resistentes al tratamiento recibido o aquellos que respondieron mal. Para este anA?lisis, los resultados ITRT fueron clasificados como testa��sensibles o testa��resistentes a los fA?rmacos. Es poco probable que el porcentaje de respuesta a los test clasificados sensibles hubiese podido haber mejorado significativamente, pero sA� se esperaba que el porcentaje de respuesta de aquellos que fueron resistentes al test podrA�a haber mejorado considerablemente entre un 12-49%, especialmente cuando el test identificaba tratamientos alternativos sensibles. A continuaciA?n se resumen los resultados:

a�� Leucemia LinfA?tica CrA?nica (LLC): 720 correlaciones publicadas entre resultados ex vivo y respuesta pacientes

69% de los pacientes responde al tratamiento

a�? De estos, 83% de los pacientes sensibles respondieron

a�� Riesgo relativo 0.83 [Intervalo de confianza 0.78-0.89, P < 0.0001] a�? Mientras el 19% de los pacientes resistentes respondieron a�� Riesgo relativo 3.66 (2.6a��5.1; P < 0.0001)

a�� Linfoma no-Hogking (LNH): 85 correlaciones publicadas entre resultados ex vivo y respuesta pacientes

54% de los pacientes responde al tratamiento

a�? De estos, 73% de los pacientes sensibles respondieron

a�� Riesgo relativo 0.74 (0.58a��0.95; P = 0.025)

a�? Mientras el 12% de los pacientes resistentes respondieron

a�� Riesgo relativo 4.69 (1.59a��13.8; P < 0.0001)

a�� Leucemia Aguda No LinfoblA?stica (LANL): 621 correlaciones publicadas entre resultados ex vivo y respuesta pacientes

72% de los pacientes responde al tratamiento

a�? De estos, 88% de los pacientes sensibles respondieron

a�� Riesgo relativo 0.82 (0.77a��0.90; P < 0.0001)

a�? Mientras el 36% de los pacientes resistentes respondieron

a�� Riesgo relativo 2.01 (1.65a��2.45; P < 0.0001)

a�� Leucemia LinfoblA?stica Aguda (LLA): 304 correlaciones publicadas entre resultados ex vivo y respuesta pacientes

81% de los pacientes responde al tratamiento

a�? De estos, 91% de los pacientes sensibles respondieron

a�� Riesgo relativo 0.90 [0.84-0.96, P=0.002]

a�? Mientras el 49% de los pacientes resistentes respondieron

a�� Riesgo relativo 1.65 [1.29-2.11, P < 0.0001] En conjunto, estos datos sugieren que este tipo de test de muerte celular aplicados como test de medicina personalizada podrA�an mejorar los porcentajes de respuesta con un incremento probable de los tiempos de supervivencia libre de progresiA?n y supervivencia global en pacientes con hemopatA�as malignas, particularmente de aquellos que el test les identifica como resistentes al fA?rmaco. El primer ensayo clA�nico prospectivo y randomizado de estos test ex vivo se ha llevado a cabo en el Reino Unido en pacientes con Leucemia LinfA?tica CrA?nica (UK LRF CLL4) (Catovsky et al. 2007). En este ensayo se incluyA? el mA�todo TRAC para la evaluaciA?n de apoptosis inducida por fA?rmacos desarrollados por el Dr. Bosanquet, como factor pronA?stico en relaciA?n con la respuesta de los pacientes al tratamiento (Bosanquet et al. 1996). El ensayo UK LRF CLL4 empezA? en 1999 e incluyA? un total de 777 pacientes sin tratar con LLC y se randomizaron con Clorambucilo (Clo) o Fludarabina (Flu). La poblaciA?n tratada con Fludarabina se dividiA? entre Fludarabina sola (Flu) o Fludarabina mA?s Ciclofosfamida (FluCic). Independientemente, los pacientes se dividieron en 3 grupos dependiendo de su respuesta a los fA?rmacos testados con TRAC: FA?rmaco Resistentes (FR), FA?rmaco Sensibles (FS) y FA?rmaco Intermedios (FI). Estos 3 niveles de respuestas medidas ex vivo muestran una buena correlaciA?n con la respuesta clA�nica de los pacientes, como se recoge en la Tabla 1 (Bosanquet et al. 2006). AsA�, un 49% de los pacientes eran FS y la mayorA�a de ellos (90%) respondieron a la quimioterapia, mientras que un 9.5% eran FR detectA?ndose respuesta a quimioterapia A?nicamente en el 31% de los casos. De los 24 pacientes FR a Clo, 71% eran FS o FI a Flu y todos mostraban ser FS o FI a la combinaciA?n FluCic, es decir que el test ex vivo podrA�a haber sugerido un tratamiento mA?s efectivo asociado a un mejor pronA?stico. En contrapartida, de los 14 pacientes FR a Flu, solo 36% eran FS o FI a la combinaciA?n FluCic.

Existe consenso acerca del mecanismo por el que la gran mayorA�a de los fA?rmacos citotA?xicos eliminan cA�lulas malignas y que consiste habitualmente en la inducciA?n de apoptosis (Hannun 1997; Aragane et al. 1998). Este proceso con frecuencia empieza en unas horas (Del Bino et al. 1999). Actualmente disponemos de varios test de muerte celular basados en la evaluaciA?n de marcadores de apoptosis fundamentados en distintas propiedades celulares como por ejemplo: 1) cambios en el potencial de membrana de la mitocondria utilizando DiOC6 o JC-1 (Liu et al. 2002; Tabrizi et al. 2002), 2) fragmentaciA?n internucleosA?mica del ADN nuclear identificado mediante el empleo de TDT en el test TUNEL (Liu et al. 2002) con el uso de electroforesis o marcaje con naranja de acridina (Kim et al. 2000; Konstantinov et al. 2002; Ofir et al. 2002; Tabrizi et al. 2002) y 3) identificando fragmentos proteolA�ticos de la polimerasa poli-(ADP-ribosa) (PARP) o de la caspasa-3 mediante anticuerpos especA�ficos (Byrd et al. 2002; Konstantinov et al. 2002; Ofir et al. 2002; Hasenjager et al. 2004; Bosanquet et al. 2006).

Sin embargo, de todos los test funcionales de apoptosis validados, el mA?s empleado es el utilizado por Vivia Biotech para su test de medicina personalizada: la detecciA?n por citometrA�a de flujo de la uniA?n de Anexina V. Esta molA�cula estA? marcada con un fluorocromo y se une a los residuos de fosfatidil-serina que se exponen en la cara externa de la membrana citoplasmA?tica durante las fases tempranas de la apoptosis (Nimmanapalli et al. 2002; Tabrizi et al. 2002).

Tecnologia exvitechA�

La medicina personalizada se considera el futuro de la medicina, y la tecnologA�a ExviTechA� desarrollada por Vivia Biotech y aplicada a las hemopatA�as malignas representa una oportunidad ideal para hacer de la medicina personalizada mA?s que una idea, una realidad.

El test de medicina personalizada desarrollado por Vivia Biotech se basa en la mediciA?n de la eficacia de diferentes fA?rmacos y sus combinaciones para inducir muerte celular selectivamente en cA�lulas neoplA?sicas de una muestra sanguA�nea.

Para el anA?lisis de las muestras se utiliza una plataforma tecnolA?gica de alto rendimiento pionera (a�?ExviTechA�a�?), basada en citometrA�a de flujo y cuya patente es propiedad de la empresa Vivia Biotech.

Esta plataforma estA? compuesta por un sistema robotizado de procesamiento de muestras y un citA?metro de flujo Cyan (Dako) articulado mediante sistema tambiA�n robotizado de muestreo y adquisiciA?n de muestras automA?tico. El software desarrollado ad-hoc permite el adecuado ensamblaje entre ambos dispositivos para procesar y analizar los datos asA� generados (Okun A., Patent Pending PCT US60/781,103 priority el 3-8-2007, a�?High Speed Sample Supply Devicea�?). Esto permite en pocas horas evaluar el efecto de un gran nA?mero de fA?rmacos y sus combinaciones.

La tecnologA�a ExviTechA�, utilizando una muestra estA?ndar del paciente, permite ampliar estos test ex vivo, evaluando cientos de fA?rmacos y combinaciones, que abarcan los posibles protocolos de tratamiento.

La Figura 2 muestra como los fA?rmacos aprobados para la hemopatA�a maligna LLC (Leucemia LinfA?tica CrA?ncia) son eficaces en unos pacientes pero no en otros, un conocido efecto detectado en muestras ex vivo por la plataforma ExviTechA�.

(|Figura 2. VariaciA?n ex vivo de la eficacia de 4 fA?rmacos en muestras de 9 pacientes LLC. Se analiza la capacidad de Doxorubicina, Clorambucilo, Mitoxantrona y Vincristina de inducir apoptosis en muestras de 9 pacientes (abscisa). La efectividad de los fA?rmacos varA�a mucho de unos pacientes a otros. La estrella identifica 2 pacientes en los cuales la Doxorubicina es el A?nico fA?rmaco eficaz de los ensayados.|)

Las hemopatA�as malignas se tratan, mayoritariamente, con una combinaciA?n de fA?rmacos (politerapia), con cientos de combinaciones teA?ricamente posibles entre ellos, lo que dificulta mA?s aA?n la predicciA?n del efecto combinatorio del tratamiento.

Nuestro finalidad es evaluar la eficacia ex vivo de los protocolos politerapia que los hematA?logos podrA�an administrar a los pacientes de manera que este test de medicina personalizada podrA�a llegar a ser una realidad clA�nica.

La Figura 3 muestra un ejemplo del beneficio de evaluar las combinaciones de fA?rmacos que constituyen los posibles protocolos de tratamiento reales, en vez de evaluar fA?rmacos individualmente.

(|Figura 3. Test de Medicina Personalizada de Vivia Biotech en una muestra de LLC evalA?a ex vivo los protocolos individuales y politerapia de tratamiento usados en la prA?ctica clA�nica. La muestra es resistente a los fA?rmacos individuales (izquierda) y a un protocolo de tratamiento (centro).
Sin embargo, existen 3 combinaciones de fA?rmacos muy eficaces que eliminan mA?s del 95% de las cA�lulas malignas (derecha). RecomendarA�amos estos protocolos a los hematA?logos.
Fluda (Fludarabina), Ciclo (Ciclofosfamida), Mitox (Mitoxantrona), Ritux (Rituximab).|)

Para este paciente de LLC, los fA?rmacos individualmente (izquierda del grA?fico) no son eficaces, sin embargo la combinaciA?n de los fA?rmacos en base a su uso en la clinica habitual, vemos que hay 3 protocolos con alta eficacia ex vivo (apoptosis > 95%): los mejores protocolos mostrados a la derecha del grA?fico. En el centro del grA?fico hay un protocolo politerapia resistente. Esta informaciA?n, basada en la eficacia ex vivo de los protocolos politerapia reales existentes en la actualidad, podrA�a ayudar al hematA?logo en la toma de decisiA?n del tratamiento de forma mA?s directa que la eficacia de fA?rmacos individuales, y representar un importante avance en estos test de medicina personalizada.

La evaluaciA?n de la eficacia de tratamientos terapA�uticos, en base a fA?rmacos y sus combinaciones, para inducir apoptosis de forma selectiva sobre cA�lulas neoplA?sicas en muestras de mA�dula A?sea, sangre perifA�rica o tejido tumoral de pacientes con HemopatA�as malignas procesadas ex vivo, contribuye a predecir su posible eficacia clA�nica. El resultado es un test de medicina personalizada que en un futuro pueda ayudar al hematA?logo a seleccionar el tratamiento A?ptimo para cada paciente.

Usando citometrA�a de flujo bastan tan solo 48 horas para evaluar la apoptosis, en vez de 4-7 dA�as que es lo que suelen tardan otros test para evaluar la eficacia de fA?rmacos.

Estudio para validacion del test de medicina personalizada

En base a toda la informaciA?n previa, vamos a realizar un estudio para nuestro test de medicina personalizada, en el que vamos a evaluar la capacidad del test para predecir la respuesta al tratamiento del paciente.

El objetivo principal de nuestro estudio es evaluar la capacidad de un nuevo test de medicina personalizada para predecir la respuesta de los pacientes al tratamiento para las hemopatA�as malignas comparando los resultados de la exposiciA?n de una muestra de mA�dula A?sea, sangre perifA�rica o tejido tumoral ex vivo de un paciente a los fA?rmacos, de forma individual y en combinaciA?n, con la respuesta clA�nica obtenida tras recibir un tratamiento con quimioterapia citotA?xica.

TambiA�n se evaluarA? si los factores pronA?stico como son las variables clA�nicas, A�ndices pronA?sticos, marcadores inmunofenotA�picos, alteraciones citogenA�ticas y moleculares, aumentan el poder predictivo del test para determinar un tratamiento A?ptimo para el paciente.

Una vez aceptada la participaciA?n por parte del sujeto para donar una parte del aspirado de la muestra de mA�dula A?sea, sangre perifA�rica o tejido tumoral y de haber firmado el consentimiento informado, la muestra se enviarA? a temperatura ambiente en el tA�rmino de 24 horas al laboratorio centralizado correspondiente para su anA?lisis. La mediciA?n de la muerte celular por depleciA?n o por apoptosis (inducida selectivamente por los diferentes fA?rmacos testados en cA�lulas neoplA?sicas y sanas de la muestra) se realiza mediante una plataforma tecnolA?gica (ExviTechA�) anteriormente detallada.

Inicialmente una alA�cuota de muestra entera es examinada mediante inmunofenotipificaciA?n por citometrA�a de flujo para la adecuada identificaciA?n de la poblaciA?n de cA�lulas malignas y para determinar el nivel inicial (basal) de apoptosis. Paralelamente la muestra restante se diluye en RPMI1640 y se divide en pequeA�as alA�cuotas que se disponen en placas de 96 pocillos, los cuales ya contienen los fA?rmacos que evaluaremos en este estudio en diferentes concentraciones y combinaciones. Los fA?rmacos evaluados serA?n siempre los mismos independientemente del tratamiento que reciba el sujeto.

Las concentraciones de los fA?rmacos que se utilizarA?n en este test han sido calculadas sobre la base de test previos ex vivo, incluyendo concentraciones publicadas en uso clA�nico.

La muestra una vez expuesta a los fA?rmacos, se incuba con Anexina V para la detecciA?n de apoptosis y tambiA�n se incuban con una combinaciA?n de anticuerpos que permitan identificar las cA�lulas malignas y las poblaciones celulares remanentes. Mediante citometrA�a de flujo se evalA?a el efecto del fA?rmaco sobre cada uno de estos grupos celulares y se cuantifica el nivel de apoptosis y muerte celular. Se evaluarA?n los fA?rmacos individuales y en combinaciA?n a diferentes concentraciones, al menos cinco dosis, lo que permite ajustar los resultados a las curvas dosis respuesta. Estos datos facilitan la evaluaciA?n de las sinergias y antagonismos de las combinaciones de los fA?rmacos. Se incluyen pocillos en los cuales no se incorporan fA?rmacos pero que son sometidos a los mismos procesos tA�cnicos para controlar el nivel de apoptosis o muerte celular no relacionadas con los fA?rmacos.

Para cada muestra, se recogerA? el mA�todo de test especA�fico utilizado, incluyendo el nA?mero de lote para todos los reactivos.

Los datos obtenidos mediante la plataforma tecnolA?gica ExviTechA� son procesados en Activity Base, una herramienta poderosa de anA?lisis bioinformA?tico que se utiliza en desarrollo de fA?rmacos y cuyas prestaciones han sido adaptadas a la finalidad de este proyecto. Todos los datos son tratados con programas de software, incluido libros de laboratorio informatizados, aprobados por la FDA y la EMEA para tratar datos clA�nicos de sujetos (por ejemplo, con trazabilidad garantizada).

EVALUACION DE LOS RESULTADOS DEL ESTUDIO DE MEDICINA PERSONALIZADA

Se recogerA? la informaciA?n clA�nica de los pacientes como: datos demogrA?ficos (ej. edad, sexo, etc.), terapias previas recibidas para la hemopatA�a maligna, clasificaciA?n e informaciA?n relacionada con la neoplasia y citogenA�tica, asA� como la respuesta clA�nica al tratamiento recibido. Estos resultados una vez se complete el tratamiento asignado por el hematA?logo al paciente, se compararA?n con los resultados del anA?lisis en la muestra de mA�dula A?sea, sangre perifA�rica o tejido tumoral.

Para la evaluaciA?n del test se dicotomizarA?n tanto la variable del resultado del test como la variable de respuesta del sujeto. El resultado del test serA? sensible o resistente. La respuesta clA�nica al tratamiento serA? evaluada de acuerdo a los criterios clA�nicos estA?ndar como a�?No Respondedoresa�? o a�?Respondedoresa�?. Se espera que los pacientes resistentes al test correspondan a los no respondedores y los sensibles al test con los pacientes que muestren respuesta clA�nica (Figura 4).

(|Figura 4.|)

La fiabilidad de los resultados ex vivo serA? analizada de dos formas diferentes: una estA? basada en los resultados de las combinaciones de fA?rmacos que recibiA? el sujeto, analizando el efecto de estas combinaciones sobre las cA�lulas del sujeto ex vivo, y una segunda, analizando el efecto de cada uno de los fA?rmacos que constituyen la combinaciA?n de forma individual.

Tradicionalmente, los test ex vivo que se han utilizado estudiaban los resultados de fA?rmacos individualmente, y el nuevo test de Vivia Biotech evalA?a tambiA�n el efecto de estas combinaciones ex vivo. Ambos anA?lisis se realizarA?n para identificar la fiabilidad respectiva de cada uno. El test tiene que ser fiable al menos en uno de los dos enfoques, analizando los fA?rmacos de forma individualizada o en combinaciA?n. Por tanto, el test se basa en la mediciA?n de la eficacia de diferentes fA?rmacos y combinaciones para inducir muerte celular selectivamente en cA�lulas neoplA?sicas de la muestra. Se considerarA? un caso como a�?concordantea�?, comparando el resultado del test con la posterior respuesta del sujeto, en las situaciones siguientes:

a�� Analizando el efecto de fA?rmacos combinados:

a�? El sujeto obtiene una respuesta al menos parcial al tratamiento y el test predictivo ex vivo indica que es sensible al tratamiento.

a�? El sujeto no responde al tratamiento y el test predictivo ex vivo indica que es resistente al tratamiento.

a�� Analizando el efecto de fA?rmacos individuales

a�? El sujeto obtiene una respuesta clA�nica al tratamiento y el test ex vivo demuestra sensibilidad a al menos uno de los fA?rmacos citotA?xicos incluidos en dicho tratamiento (valor predictivo positivo).

a�? El sujeto no obtiene una respuesta clA�nica al tratamiento y el test ex vivo demuestra resistencia a todos los fA?rmacos citotA?xicos incluidos en dicho tratamiento (valor predictivo negativo).

Se considerarA? un caso como a�?discordantea�? en las dos situaciones siguientes:

a�� Analizando el efecto de fA?rmacos combinados:

a�? El sujeto obtiene una respuesta al menos parcial al tratamiento y el test predictivo ex vivo indica que es resistente al tratamiento.

a�? El sujeto no responde al tratamiento y el test predictivo ex vivo indica que es sensible al tratamiento.

a�� Analizando el efecto de fA?rmacos individuales

a�? El sujeto obtiene una respuesta clA�nica al tratamiento y el test ex vivo demuestra resistencia a todos los fA?rmacos citotA?xicos incluidos en dicho tratamiento (falso negativo).

a�? El sujeto no obtiene una respuesta clA�nica al tratamiento y el test ex vivo demuestra sensibilidad a al menos uno de los fA?rmacos citotA?xicos incluidos en dicho tratamiento (falso positivo).

CONCLUSIONES

El test de medicina personalizada de Vivia Biotech permite evaluar las mA?ltiples combinaciones de fA?rmacos (polifarmacia) que caracterizan el tratamiento de las hemopatA�as malignas. Esto se realizarA? gracias a la tecnologA�a ExviTech, desarrollada y patentada por nuestra compaA�A�a. Esta plataforma permite evaluar el efecto de miles de fA?rmacos sobre la muestra biolA?gica de un paciente, por lo que Vivia Biotech serA? pionera en la evaluaciA?n de la polifarmacia que caracteriza a las HemopatA�as malignas.

Una vez validada la capacidad del test de predecir ex vivo la respuesta de la muestra fresca de los pacientes al tratamiento recibido, el resultado puede ayudar al hematA?logo a seleccionar el tratamiento A?ptimo para cada paciente. BM

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