Immunostep se vuelca en la lucha contra el cA?ncer

A?CA?mo surge Immunostep?

Immunostep surge como una spin off de la Universidad de Salamanca (USAL), fruto del trabajo de cuatro estudiantes y el apoyo del director del servicio de citometrA�a de flujo de la USAL el Dr. Alberto Orfao. La sociedad iniciA? actividad en septiembre de 2001 y fue el proyecto piloto de lo que hoy es el programa Galileo, destinado a la creaciA?n de empresas dentro de la universidad.

La idea era desarrollar anticuerpos monoclonales para su uso por citometrA�a de flujo. En este sentido tuvimos la oportunidad de licenciar hibridomas productores de anticuerpos frente a antA�genos leucocitarios humanos desarrollados por investigadores pertenecientes al CSIC y la UAM. De esta manera y en relativamente poco tiempo disponA�amos de un completo catA?logo para el inmunofenotipaje de enfermedades oncohematolA?gicas principalmente.

A?QuA� servicios ofrecen?

Contamos con una gran experiencia, fruto de nuestra intensa labor de investigaciA?n, en el desarrollo de hibridomas productores de anticuerpos monoclonales y en la producciA?n de policlonales. AdemA?s prestamos servicios de clonaciA?n, expresiA?n y purificaciA?n de proteA�nas recombinantes, purificaciA?n de anticuerpos y su conjugaciA?n con flurocromos y enzimas.

A?Tienen otras lA�neas de negocio?

Nuestra labor trasciende al desarrollo de anticuerpos monoclonales. Immunostep persigue colaborar en la lucha contra el cA?ncer desde la investigaciA?n, el desarrollo, la producciA?n y la comercializaciA?n de herramientas dirigidas principalmente al diagnostico de hemopatA�as malignas y a la investigaciA?n de la biologA�a y clA�nica del cA?ncer. En este contexto y si nos centramos en quA� productos tenemos en el mercado, nuestra principal lA�nea de negocio son los reactivos para diagnostico e investigaciA?n por citometrA�a de flujo, entre ellos los anticuerpos monoclonales frente a antA�genos leucocitarios humanos. Pero tambiA�n tenemos reactivos para detecciA?n de apoptosis, para anA?lisis de ADN y ciclo celular, soluciones de fijaciA?n/permeabilizaciA?n celular y estabilizantes para sangre perifA�rica, mA�dula A?sea y lA�quido encefalorraquA�deo.

A?QuA� lA�neas de investigaciA?n siguen?

En consecuencia con nuestra polA�tica y localizaciA?n, nuestra sede social estA? en el Centro de InvestigaciA?n del CA?ncer de Salamanca, la investigaciA?n y el desarrollo son la mA�dula A?sea de nuestra compaA�A�a. Trabajamos en las siguientes lA�neas de investigaciA?n:

a�� El desarrollo de anticuerpos frente a proteA�nas con interA�s diagnA?stico. Sabemos que el estudio de los perfiles de expresiA?n gA�nica en las principales enfermedades oncohematolA?gicas ha demostrado que algunos grupos de genes (para este proyecto en concreto 25 o mA?s) pueden ser de carA?cter informativo para el pronA?stico y subclasificaciA?n de la enfermedad. En la actualidad no existen herramientas para identificar estas proteA�nas por citometrA�a de flujo y la identificaciA?n, de sA?lo algunas de ellas, en el laboratorio clA�nico, se hace por biologA�a molecular.

a�? El desarrollo de anticuerpos, frente a las proteA�nas que codifican estos genes, deberA�a dar como resultado un diagnA?stico rA?pido, preciso y altamente sensible por citometrA�a de flujo para la clasificaciA?n y el seguimiento de los pacientes con neoplasias hematolA?gicas.

a�� Otro proyecto en marcha es el desarrollo de Microarrays de proteA�nas. Los microarrays de proteA�nas se basan en la tecnologA�a desarrollada para la fabricaciA?n de los microarrays de ADN. La diferencia es que en vez de inmovilizar A?cidos nucleicos, las molA�culas que se inmovilizan sobre el soporte son de naturaleza proteica, como anticuerpos, por ejemplo. En este sentido hemos acumulado una gran experiencia en inmovilizaciA?n de proteA�nas sobre diferentes tipos de superficie. Somos capaces de inmovilizar proteA�nas con la orientaciA?n adecuada, de manera altamente reproducible y con una gran estabilidad.

a�? Los microarrays de proteA�nas y anticuerpos permiten el anA?lisis a gran escala de las diferencias en los perfiles de expresiA?n de proteA�nas y el estudio de las interacciones entre las mismas. AsA�, podemos relacionar los diferentes perfiles de expresiA?n con el fenotipo de la enfermedad.

a�� Como sabes la base molecular del cA?ncer es la acumulaciA?n de mutaciones. En concreto de mutaciones somA?ticas en oncogenes, genes supresores de tumores o genes de susceptibilidad. Por lo tanto, la utilidad diagnA?stica de herramientas que nos permitan identificar los productos de estos genes alterados es de una enorme importancia. Sin embargo, obtener anticuerpos frente a proteA�nas mutadas es una tarea complicada. La homologA�a entre proteA�nas silvestre y mutada obliga a utilizar tecnologA�as mA?s potentes. Para este fin contamos con una librerA�a scFv phage display de mA?s de 108 millones de copias.

A?CuA?l es su mercado?

Nuestro mercado es el diagnA?stico y la investigaciA?n. Tenemos presencia en un buen nA?mero de paA�s a travA�s de nuestros distribuidores. Nuestro catA?logo de productos estA? presente en paA�ses como Alemania, Italia, Reino Unido, Grecia, Brasil, Grecia o India entre otros.

A?En quA� consiste la CitometrA�a de flujo?

La citometrA�a de flujo es una tA�cnica de anA?lisis celular que permite medir las caracterA�sticas de dispersiA?n de luz y fluorescencia que poseen las cA�lulas. El sistema presenta cuatro componentes: el enfoque hidrodinA?mico, principio utilizado para lograr que las cA�lulas pasen de una en una por delante del lA?ser; el lA?ser; el sistema A?ptico, que permite enfocar la luz emitida por el lA?ser sobre la cA�lula y que esta compuesto de lente de enfoque y espejos dicroicos y por A?ltimo los detectores y el sistema electrA?nico o digital.

Al atravesar el rayo de luz procedente del lA?ser, las cA�lulas interaccionan con este causando dispersiA?n de la luz, basA?ndose en la difracciA?n de la luz en sentido frontal, se puede evaluar el tamaA�o de las cA�lulas que pasan y al medir la reflexiA?n de la luz de manera lateral se evalA?a su complejidad. AdemA?s, el marcaje de las cA�lulas con anticuerpos conjugados con molA�culas fluorescentes de la dispersiA?n de la luz, si previamente a su anA?lisis se coloca a las cA�lulas nos permite evaluar el fenotipo celular, es decir, que antA�genos complementarios a los anticuerpos monoclonales usados presentan las diferentes poblaciones celulares.

El uso de molA�culas fluorescentes con diferentes caracterA�sticas de emisiA?n/excitaciA?n permite analizar la presencia de varios marcadores de manera simultA?nea, o lo que es lo mismo permite hacer un anA?lisis multiparamA�trico sobre una misma cA�lula.

El pasado aA�o creron una plataforma de desarrollo rA?pido de anticuerpos para la detecciA?n de enfermedades como cA?ncer o sida, A?QuA� supone esta plataforma? A?CuA?ndo estarA? lista?

Las mejores estimaciones para el nA?mero total de las proteA�nas codificadas por el genoma humano son de 300.000 a 1 millA?n. Las tecnologA�as y los instrumentos utilizados para proteA?mica deben de ser capaces de adaptarse a la enorme complejidad del proteoma humano. Estas tecnologA�as incluyen mA�todos para producir anticuerpos de la mA?s alta calidad y herramientas para utilizarlos de manera mA?s eficiente.

El desarrollo de nuevas tecnologA�as de cara a la generaciA?n de anticuerpos es absolutamente prioritario, para la identificaciA?n y mejor conocimiento de fenA?menos biolA?gicos, para terapia y diagnA?stico. En la actualidad, existe un gran aumento de demanda de desarrollo de anticuerpos, policlonales y monoclonales, esto se debe en parte a la existencia de multitud de proteA�nas huA�rfanas de anticuerpos, esto se hace especialmente evidente en marcadores de diagnA?stico y mA?s evidente si cabe en proteA�nas mutadas o proteA�nas quimA�ricas implicadas en diferentes enfermedades que puedan servir de marcadores diagnA?stico.

Como es sabido, la producciA?n de anticuerpos monoclonales se estableciA? a partir de las investigaciones llevadas a cabo por Georges KA�hler y CA�sar Milstein, esta es la tecnologA�a clA?sica y consiste en la generaciA?n de una lA�nea estable, secretora de una inmunoglobulina contra el antA�geno deseado, fruto de la fusiA?n de dos cA�lulas diferentes. Sin embargo esta tecnologA�a presenta algunos inconvenientes: con nuestra infraestructura anterior tenA�amos una limitaciA?n severa en lo que se refiere al nA?mero de desarrollos. AdemA?s, los desarrollos se prolongaban durante demasiado tiempo, entre 6 y 9 meses en el mejor de los casos y exigA�a el empleo de mucha mano de obra directa.

Esta plataforma permite un desarrollo, eficaz, rA?pido y a gran escala de hibridomas productores de anticuerpos monoclonales (AcMo) especA�ficos del antA�geno deseado. PermitiA�ndonos aumentar nuestra capacidad en el nA?mero de desarrollos, el ahorro de tiempo, la mejorara de la eficacia y el abaratamiento del proceso.

La plataforma se sustenta sobre la clonaciA?n y selecciA?n de los hibridomas de interA�s mediante un separador celular de fluorescencia y la automatizaciA?n del a�?liquid handlinga�? para ELISA, cultivos y criopreservaciA?n celular.

La plataforma ya estA? operativa a nivel interno y en los prA?ximos dos meses estarA? disponible para la prestaciA?n de servicios a terceros.

A?QuA� papel desempeA�a la I+D dentro de la empresa?

Como hemos tenido oportunidad de comentar es la columna vertebral de nuestra organizaciA?n.

A?De dA?nde obtienenla financiaciA?n?

En la actualidad estamos participados por Unirisco Galicia SCR e I+D Unifondo, un fondo de riesgo gestionado por UNINVEST. De manera significativa y para inversiones y proyectos de I+D, recurrimos a la ADE Inversiones y Servicios de la JCyL, que siempre ha apoyado nuestras iniciativas a travA�s desde sus planes y lA�neas de ayuda para empresas. AdemA?s, hemos participado de diferentes programas nacionales.

A?CuA?les son las expectativas de futuro de Immunostep?

Queremos seguir creciendo y si es posible mA?s rA?pidamente que en el pasado. Estamos apostando muy fuerte para aumentar el nA?mero y calidad de nuestros desarrollos y en consecuencia de nuestra propiedad industrial. Trabajamos para licenciar algunos de nuestros desarrollos con compaA�A�as de carA?cter multinacional con mayor capacidad de explotaciA?n y comercializaciA?n de los desarrollos. BM