EvoluciA?n de las tA�cnicas moleculares aplicadas en biotecnologA�a: de la PCR tradicional a los sistemas gelificados de alta resoluciA?n

El inicio de esta evoluciA?n en paralelo tuvo lugar durante los aA�os A?90 con la aplicaciA?n masiva de la PCR; una tA�cnica capaz de multiplicar porciones de un determinado material genA�tico, con una alta fidelidad sobre cada una de las variaciones encontradas en origen, para su posterior estudio y anA?lisis.

Detectando el potencial diagnA?stico de este descubrimiento en el marco de la BioquA�mica moderna, una serie de desarrollos iniciales permitieron plasmarlo en desarrollos de aplicaciA?n diagnA?stica a los largo de las dos A?ltimas dA�cadas. Entre estos desarrollos cabe destacar varios kis pioneros en el A?mbito de la seguridad biolA?gica y calidad alimentaria para la identificaciA?n de GMOs y trazabilidad de materias primas, o diversos kits de caracterizaciA?n genA�tica aplicados al A?mbito de la salud. Estos planteamientos de genotipado inicial para patA?genos como los virus hepatotropos o herpA�ticos aA?n presentes en el catA?logo de esta compaA�A�a, junto con los avances experimentados en otros campos de la biologA�a molecular, han resultado claves para los continuos adelantos tA�cnicos enfocados a monitorizar el funcionamiento molecular de los seres vivos, llegando a convertirse en excelentes exponentes de lo que se conoce como economA�a basada en el conocimiento.

Dando continuidad al desarrollo de nuevos mA�todos de genotipado, uno de los avances fundamentales se ha logrado con el uso de la tA�cnica de PCR a tiempo real para la detecciA?n de secuencias en diferentes tipos de muestras, incluyendo las provenientes de seres humanos y animales, y de la industria alimentaria. Esta tA�cnica, ademA?s de permitir la detecciA?n de trazas genA�ticas en cantidades residuales no detectables mediante otras aproximaciones, ha definido un nuevo punto de partida para la aplicaciA?n de tA�cnicas moleculares en nuevos contextos de salud. Estos avances tambiA�n estA?n recogidos a modo de diferentes productos de a�?segunda generaciA?na�? en el catA?logo de Biotools, ilustrando cA?mo la qPCR comenzA? el camino de la implantaciA?n efectiva en estudios diagnA?sticos, de validaciA?n en la industria alimentaria o en el campo de la epidemiologA�a molecular. De esta manera, se confirma el discurrir paralelo que tienen los avances en el campo de la I+D y la generaciA?n de productos que directamente se aplican para mejora de las condiciones diagnA?sticas, de anA?lisis genA�tico a nivel de poblaciA?na�� etc.

Llegados a este punto, los avances que ha experimentado durante los A?ltimos aA�os tanto el campo de la BiologA�a Molecular, como el A?mbito de su explotaciA?n indiustrial, estA?n marcados mA?s por la combinaciA?n de tA�cnicas preexistentes, que por el descubrimiento de nuevas actividades enzimA?ticas. De nuevo, la integraciA?n de tecnologA�as de desarrollo propio como el proceso de GelificaciA?nA� para estabilizaciA?n a 4A?C de reactivos de PCR, la generaciA?n de sondas LionA� propias y especA�ficas para qPCR o las tA�cnicas de microsecuenciaciA?n, ilustran este proceso a travA�s de la evoluciA?n de esta compaA�A�a. Estos hitos adquieren importancia a nivel individual, ya que por ejemplo la GelificaciA?nA� permite por primera vez vencer la cadena del frA�o para reactivos moleculares de carA?cter enzimA?tico, que pueden estabilizarse a 4A? durante largos periodos de tiempo como mezclas de reacciA?n complejas. Pero igualmente ponen en valor su uso conjunto, al permitir estandarizar reacciones diagnA?sticas en formatos gelificados, individualizados y estables, con gran proyecciA?n clA�nica. De hecho, los avances mA?s recientes en el A?mbito de la aplicaciA?n en diagnA?stico de estos desarrollos, se sustancian con nuevas patentes propias para la identificaciA?n de polimorfismos de longitud variable en fragmentos de PCR mediante pirosecuenciaciA?n en anA?lisis clA�nico. Este avance en particular, permite la detecciA?n exacta mediante el anA?lisis de secuencias patA?genas en muestra directa, hemocultivo o hemocultivo, afianzando la entrada de nuevas tecnologA�as de anA?lisis molecular al medio hospitalario. De esta manera, Biotools continA?a generando un marco de referencia donde puede seguirse el desarrollo de la investigaciA?n bA?sica a travA�s del lanzamiento de nuevos productos, aplicables a campos tan distintos como la medicina personalizada o la epidemiologA�a molecular aplicada a la bA?squeda de relaciones causales entre diferentes cepas de interA�s clA�nico. BM

Referencias

a�? www.biotools.eu

a�? Novel genes retrieved from environmental DNA by polymerase chain reaction: Current genome-walking techniques for future metagenome applications.

a�? Kotik M. J Biotechnol. 2009 Aug 25. PMID: 19712711

a�? Bench-to-bedside review: the promise of rapid infection diagnosis during sepsis using polymerase chain reaction-based pathogen detection.

a�?Dark PM, Dean P, Warhurst G. Crit Care. 2009;13(4):217. Epub 2009 Jul 15.PMID: 19664174